甜叶菊中甜菊糖苷检测技术的研究进展

时间:2019-03-25 06:35:22 来源:宁城信息网 作者:匿名



首先,化学发光

化学发光法是通过测量化学反应中发出的光的强度来检测和定量物质的方法。据报道化学发光用于检测甜菊糖苷含量。 Yang Dan等[1]使用Fe(CN)63-通过在碱性介质中氧化甜菊甙来产生强烈的化学光来测定甜菊甙的含量。根据不同的氧化剂,不同的Fe(CN)63浓度,不同的NaOH浓度,不同的表面活性剂和不同的流速,确定了甜叶菊粗提物中甜菊糖苷的最佳测定条件。碱性Fe(CN)63-作为氧化剂,浓度为5×10-4mol/L(最大发光强度),NaOH浓度为0.5mol/L,活性泵和辅助泵的转数是45r/Min。

二,柱层析

柱色谱一直是化学工业中不可或缺的工具。它的一个优点是它可以改变固色的表面化学性质以调节选择性。对于液相色谱尤其如此。高效液相色谱(HPLC)是一种新型液相色谱,是通过经典液相色谱法开发的。它从原始大气压力变为高压输送流动相,并用小颗粒或经过特殊处理的柱填料代替原装。多孔填料,可提高分离效果[2]。作为分离的核心组分,通过将色谱填料填充到柱管中获得柱,柱管可分为正相柱和反相柱。

最近,除反相色谱和离子交换色谱之外的另一种分离模式逐渐成为研究的热点:亲水作用色谱(HILIC)。它使用强极性固定相与流动相结合,流动相由高比例的有机相/低比例的水相组成,使亲水性溶质与极性官能团相互作用,从而在硅胶表面上保留亲水层。性保留。 HILIC在1990年由Alpert从标准正相色谱中分离出来,并且主要用于在没有保留色谱的情况下分离强极性化合物。例如,分离合成和天然多肽,分离生物分子如糖和糖缀合物,糖肽,磷酸肽,磷脂,寡核苷酸和膜蛋白。 Woelwer-Rieck UrSula等。 [3]使用HILIC柱测定甜叶菊中的甜菊甙和莱鲍迪甙A.用水提取后,通过固相微萃取(SPE)纯化甜叶菊,并用HILIC和氨基柱分离。比较两者的分析结果。最后,选择HILIC柱作为分析柱。分析条件如下:柱为Luna-HILIC(250×4.6mm,59m,Phenomenex,Aschaffenburg,Germany),流动相V乙腈:V水=75:25,柱温35℃,流速1.5mL /分钟三,超高压液相色谱

通过使用超高压液相色谱(UHPLC)作为综合二维系统的第二维来分析甜叶菊提取物。作者使用多胺柱(二氧化硅键合的多胺作为固定相)作为第一维,分离甜叶菊提取物,然后使用反相C18柱作为UHPLC柱进行二维分离。 Sub-2um色谱柱(2.1 mm x 30 mm,70°C储存)可在20 s内完成分离[4]。

四,核磁共振谱

核磁共振光谱(NMR)是用波长为10到100米(电磁波的波长更长,能量更低;频率相当于MHz的数量级)的电磁波照射样品以获得分子核(包括氢)的技术原子和碳原子)。结构信息。 NMR光谱可以提供关于分子构型,结构和运动的各种信息。 Valerio Pieri等人。使用1H NMR来表征和定量纯化的甜菊苷。样品可以是纯化的提取物或来自纯化过程的产物。作者使用2D NMR技术鉴定并通过1H NMR(葸作为内标)进行定量。氘代吡啶:肼二甲基亚砜=6:1作为溶剂溶解样品,溶剂可以很好地获得完整的信号峰。结果与食品添加剂联合专家委员会(JECFA)发布的HPLC-UV方法非常相似,NMR方法独立于标准,并且比HPLC-UV更快。可以看出,NMR可用作高效液相色谱的替代品,用于甜叶菊提取物的质量监测[5]。

5.近红外光谱

近红外(NIR)光谱区域是波长范围为0.8至2.5μm(波数范围为12500至4000cm-1)的电磁波。原理是吸收由分子振动状态中的一些较低能量电子跃迁和跃迁产生的近红外光谱区域。使用近红外光谱,可以直接分析不透明样品,如固体,颗粒,粉末和糊状样品,无需添加化学试剂。陈雪英[6]用近红外光谱法定量测定甜叶菊中的甜菊糖苷。作者收集了不同浓度和不同批次的甜菊糖溶液的透射光谱,并根据不同的样品选择了相应的光谱范围。作者通过PLs(偏最小二乘法)模拟甜叶菊样品中甜菊糖的含量,最后建立了预测甜叶菊水溶液中各组分含量的模型,R2>0.92。 Congmin等人。使用HPLC方法建立NIR模型,用于直接测定甜叶菊中的甜菊甙和莱鲍迪甙A.作者从山东,安徽,江苏等地选取了72个甜叶菊,根据这些样品的红外光谱选择了4035~6934cm-1的光谱采集范围。使用其中一个示例来构建模型。将获得的模型应用于含量测量,并将获得的结果与HPLC测量的结果进行比较,显示甜菊糖苷具有55至4.04%的差异,并且莱鲍迪甙A具有1.47至3.30%的差异。

6.毛细管电泳

毛细管电泳是毛细管内高电场强度作用下的物质,内径为50~100um。它可以根据分子电荷,质量和迁移率的差异(也称为“扭曲”)有效地分离。邵汉娟等人用这种方法分离和测定甜叶菊中的甜菊糖苷。作者使用DMF(二甲基甲酰胺)溶解样品,并使用Tris-borax缓冲液作为分离甜菊糖的系统,并优化缓冲液浓度,缓冲液pH,工作电压,柱温,进样体积等条件。最后,确定了检测计划:Tris。硼砂浓度为50 mmol/L,pH值为8.5,工作电压为25 kV,柱温为30°C,进样量为3 psi×s [7]。

引用

[1]。杨丹,郝在斌,流动注射化学发光法测定甜菊糖甙。化学工程师,2005。19(4):,第23-24页,41。

[2]。范云昌等离子液体液 - 液萃取 - 高效液相色谱法测定水中酚类化合物。分析化学,2008。36(9):第1157-1161页。

[3]。 Wbelwer-RieckU,Lankes C,Wawrzun A,et a1。改进的HPLC方法用于评价甜叶菊(Stevia rebaudiana)的1个主要甜菜碱成分“J1.Euro.Food Res.Techn01。,2010,231f4):581-588。[4]。 Francesco C,Pierluigi D,Karolina J,et a1。 ,采用超高压液相色谱法作为二维系统的二维系统,用于分析甜叶菊(Stevia rebaudiana)提取物“J1。 J. Chromatogr。 A,2011(1218):2012-20l8。

[5]。 Pieri V,Belancic A,Moralesand S,et a1。通过1H NMR光谱法鉴定和鉴定甜叶菊甜菜素中主要甜菊醇糖苷的含量“J1.J.Agr.Food Chem,201,549:4378-4384。

[6]。陈雪莹,李佩??瑞,陈勇,等。近红外光谱法定量测定甜菊甙[J]。中国食品杂志,2009,9(5):195-199。

[7]。邵汉娟胡永刚丁亮等毛细管电泳法有效分离和测定甜菊甙的新方法[J]。分析科学杂志,2001,17(2):127.130。

[关键词]甜叶菊,甜菊糖,含量检测,国家标准物质网络

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